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NobleRyder 紫外法蛋白定量試劑盒

  • 型   號:P2815
  • 價   格:
  • 更新時間:2024-09-26
  • 廠家性質(zhì):經(jīng)銷商

NobleRyder 紫外法蛋白定量試劑盒
NobleRyder 即用型液體試劑 P2815-250T
NobleRyder 即用型液體試劑 P2815-500T

紫外法蛋白定量試劑盒

產(chǎn)品簡介:

蛋白質(zhì)分子中存在含有共軛雙鍵的lao氨酸、se氨酸、苯bing氨酸,使蛋白質(zhì)在270~290nm波長范圍內(nèi)具有吸收紫外光的性質(zhì),其中l(wèi)ao氨酸的最大吸收峰為275nm,se氨酸的最大吸收峰為280nm,苯bing氨酸的最大吸收峰為257nm。在上述波長范圍內(nèi),蛋白質(zhì)溶液的吸收值與其濃度呈正比,可作定量測定。

NobleRyder 紫外法蛋白定量試劑盒優(yōu)點是:操作迅速、簡便,不易受低濃度鹽類的干擾;缺點是與標準蛋白中l(wèi)ao氨酸、se氨酸含量差異較大的蛋白質(zhì),準確性較差。樣品中含有嘌呤、嘧啶及核酸會干擾檢測結(jié)果。

NobleRyder 紫外法蛋白定量試劑盒 

產(chǎn)品組成:

                       編號

名稱

P2815

250T

P2815

500T

Storage

試劑(A): 蛋白稀釋液(10×)

50ml

100ml

RT

試劑(B): 蛋白標準(BSA)

2×20mg

3×20mg

RT

使用說明書

1份

 

自備材料:

1、 分光光度計或酶標儀

2、 96孔板或離心管

 

操作步驟(僅供參考)

1、 用去離子水或蒸餾水稀釋蛋白稀釋液(10×)至1×,即為蛋白稀釋工作液。取1支20mg的蛋白標準,加入20ml蛋白稀釋工作液,即配制成蛋白標準(1mg/ml),-20℃保存。

2、 標準曲線法:取若干試管或96孔板,如下操作以分光光度法為例。選用1cm的石英比色皿,在280nm處以第1管作為調(diào)零點,分別檢測各管吸光度,以A280為縱坐標,以蛋白質(zhì)濃度為橫坐標,繪制標準曲線。

試管號

1

2

3

4

5

6

7

8

蛋白標準(1mg/ml)

0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

3.0

4.0

蛋白稀釋工作液(ml)

4.0

3.5

3.0

2.5

2.0

1.5

1.0

0

蛋白濃度(mg/ml)

0

0.125

0.250

0.375

0.500

0.625

0.750

1.000

1ml待測蛋白加至3ml的蛋白稀釋工作液中,混勻,分光光度計或酶標儀測定A280。根據(jù)標準曲線計算出樣品的蛋白濃度。

3、 Lowry-Kalckar法(又稱280nm和260nm吸收差法):對于含有核酸的蛋白質(zhì),無需制作標準曲線。以蛋白稀釋工作液作為調(diào)零點,取1ml待測蛋白加至3ml的蛋白稀釋工作液中,混勻,分光光度計或酶標儀測定A280 A260。根據(jù)經(jīng)驗公式計算出待測樣品的蛋白濃度,如果蛋白濃度過高應用蛋白稀釋工作液稀釋后再行檢測。

蛋白質(zhì)濃度(g/L)=1.45×A280-0.74×A280

4、 Waddell法(又稱215nm和225nm吸收差法):對于蛋白質(zhì)含量較少的溶液,適用于該法。取若干試管或96孔板,如下操作以分光光度法為例。以蛋白稀釋工作液作為調(diào)零點,取1ml蛋白標準(1mg/ml)加至3ml的蛋白稀釋工作液中,混勻,分光光度計或酶標儀測定A215 A225。以215nm與225nm吸光度值之差(D=A215-A225)為縱坐標,以蛋白濃度為橫坐標,繪制標準曲線,再測出未知樣品的吸收差,即可由標準曲線查出未知樣品的蛋白質(zhì)濃度?;蛘卟挥弥谱鳂藴是€,直接按照如下經(jīng)驗公式計算:

蛋白質(zhì)濃度(g/L)=144×(A215-A225)。

 

注意事項:

1.蛋白標準(BSA)粉末溶解于蛋白稀釋工作液,該液中含有防腐劑,不影響后續(xù)檢測,該蛋白標準液-20℃保存。

2.待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中,否者待測蛋白與蛋白標準中所含非蛋白成分不一致,有可能導致測定不準確。

3.如果沒有分光光度計,也可以使用酶標儀測定,但應考慮根據(jù)比色皿的最小檢測體積。

4.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

有效期: 12個月有效。蛋白標準配制成溶液后應-20℃凍存。

NobleRyder 紫外法蛋白定量試劑盒 

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